尊龙凯时细胞培养条件：气相组成为95%空气和5%二氧化碳，培养温度设定在37℃。A875细胞系是一种人类黑色素瘤细胞，源自皮肤癌，广泛应用于肿瘤生物学研究、药物筛选及癌症机制的探索。该细胞系已通过短串联重复序列（STR）鉴定，确保其遗传特征的稳定性和真实性。

尊龙凯时推荐的传代方法为初次1:2传代，需在2天后更换培养液。建议购买时搭配其他产品以享受优惠。收到细胞后，建议尽快处理，培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口，以确保细胞运输的最佳效果。

收到细胞后，请勿立即开启瓶盖，确保核对培养瓶上标注的细胞名称与所订购的一致，如有破损或漏液等异常情况，请及时反馈。若无异常，可在显微镜下观察细胞生长情况，并拍摄不同倍数的照片（建议40x、100x、200x各一张），前三天的照片将作为重要的售后依据。如不提供照片，默认细胞状态良好。

贴壁细胞传代步骤

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁的PBS冲洗细胞1-2次。
2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液，置于37℃培养箱消化1-2分钟。观察细胞消化状况，若大部分细胞圆形并脱落，立即轻敲培养瓶，加5ml完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打以使细胞完全脱落，再吸出悬液，转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟，弃去上清，加入1-2ml完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2比例分瓶（两个T25瓶），补充新鲜完全培养基至5-8ml/瓶，并放入37℃、5%CO2培养箱中继续培养。

悬浮细胞传代步骤

1. 实施半换液法，静置培养瓶约1小时，轻吸掉3ml培养基，然后补充3ml完全培养基，若培养基颜色变化缓慢，可直接加500μl FBS。
2. 对于离心换液法，将细胞悬液收集于离心管，1000rpm离心5分钟，弃去上清，加入1-2ml培养液恢复重悬，按1:2比例分到新T25瓶中，再添6-8ml新鲜完全培养基保持细胞活力，后续传代按1:2至1:5比例进行。

细胞冻存方法

1. 细胞生长覆盖T25培养瓶80%时，弃去培养液，用PBS清洗一次。
2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶，待细胞变圆后加入5ml完全培养基终止消化，轻轻吹打使之脱落，转移至15ml离心管，1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清，加入1ml的冻存液，混合均匀后转移至冻存管。
4. 将冻存管直接放入-80℃冰箱中，之后如需转入液氮罐中，需在-80℃冰箱中存放至少24小时后再转移。

细胞复苏步骤

1. 从液氮中取出细胞冻存管（注意佩戴防护面具），快速将其放入37℃水浴解冻，直至无结晶，随后用75%酒精擦拭管外壁。
2. 转移细胞至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清，加入5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶中，并放回37℃、5%CO2培养箱中。
4. 第二天换用新鲜完全培养基继续培养。

注意事项

在运输过程中，一些细胞可能会因粘附不牢而脱落，属正常现象。如脱落较多，可将所有培养液收集至离心管中，处置后重新培养。细胞状态异常时，请根据具体情况及时反馈以便处理。

重发条款

细胞在运输途中若遭遇问题或收到污染样品等情况，须在48小时内联系以核实重发。对于因客户操作不当或未按照推荐培养体系处理的细胞，不予重发。确保在接收细胞后的2-3天内拍照，如3天未反馈，则视为产品合格。