尊龙凯时提供的hPSC诱导分化内耳类器官试剂盒（abs90132-1kit）是一款用于生物医学研究的重要工具。以下是该试剂盒的详细组成和实验准备。

一、实验准备

1. 试剂盒组成

该试剂盒包含多个阶段所需的培养基及补充剂：

• EB诱导阶段：
  • IE01EB形成培养基：30mL，需在-20℃保存，保质期12个月
  • IE01-A 补充剂A：40μL，需在-20℃保存，保质期6个月
• EB分化阶段：
  • IE02基础培养基：120mL，需在-20℃保存，保质期12个月
  • IE02-B 补充剂B：250μL，需在-20℃保存，保质期6个月
  • IE02-C 补充剂C：70μL，需在-20℃保存，保质期6个月
  • IE02-D 补充剂D：50μL，需在-20℃保存，保质期6个月
• 耳泡形成阶段：
  • IE03基础培养基：250mL，需在-20℃保存，保质期12个月
  • IE03-E 补充剂E：12mL，需在-20℃保存，保质期6个月
• 内耳类器官成熟阶段：
  • IE04成熟培养基：200mL，需在-20℃保存，保质期12个月
  • 类器官成熟阶段Matrigel：500μL，需在-20℃保存，保质期6个月

2. 辅助试剂

辅助试剂列表如下：

• PBS（abs962）：500mL，存储在2~8℃或室温，有效期12个月。
• Advance人多能干细胞培养基（abs9404）：100mL，需在-20℃保存，有效期2年。
• 人多能干细胞消化液（abs9409）：100mL，需在-20℃保存，有效期2年。

3. 实验耗材

实验耗材清单：

• 细胞培养板（标准透明6孔板，abs7033）：1箱，室温保存，保质期3年。
• 细胞培养板（标准透明12孔板，abs7034）：1箱，室温保存，保质期3年。
• 细胞培养板（标准透明24孔板，abs7035）：1箱，室温保存，保质期3年。
• 离心管（5mL，abs7119）：1箱，室温保存，保质期3年。
• 一次性移液管（10mL，abs7053）：1箱，室温保存，保质期3年。
• 吸头（10uL，abs7072）：1箱，室温保存，保质期3年。

二、诱导流程图

本部分将介绍诱导过程的步骤，确保实验的有效性和可靠性。

三、试剂盒使用流程

① EB形成（2天）

1. 在基质胶包被的六孔板中将hPSC培养至70-80%汇合度。
2. 吸去培养基并进行PBS洗涤。
3. 加入人多能干细胞消化液，于37℃消化3分钟。
4. 准备EB形成完全培养基，终止消化并重悬细胞。
5. 将细胞悬液转移至96孔板，并在37℃，5% CO2的培养箱中培养。

② EB分化阶段（12天）

根据不同的天数（D0-D12），依次添加补充剂，进行细胞培养与分化。

③ 耳泡形成阶段（6天）

将EB诱导后的细胞转移至适宜的培养皿中，添加混合培养基，培养诱导耳泡形成。

④ 内耳类器官成熟阶段（42天）

逐步更换培养基至成熟培养基，进行长期培养，最终获得具有功能的成熟内耳类器官。

产品推荐与存储

所有产品的存储条件及有效期信息请参考此前列出的清单。对于寻找性价比高的生物医疗解决方案，选择尊龙凯时的试剂盒将是明智之举。